DETEKSI Helicobacter pylori DENGAN TEKNIK PCR DAN PENERAPAN DNA BERLABEL 32P UNTUK STUDI RESISTENSINYA TERHADAP OBAT

Infeksi
Helicobacter pylori (H. pylori) menyebabkan gastritis kronis dan memperbesar risiko kanker
lambung, terutama strain H. pylori yang memiliki cag pathogenicity island (PAI). Dalam penelitian
ini telah dilakukan pendeteksian H. pylori secara molekuler pada 73 biopsi lambung segar dan 10
irisan jaringan (slide) dari pasien gastritis yang menjalani uji endoskopi di RSCM Jakarta. Ekstrak
asam deoksiribonukleat (DNA) diamplifikasi menggunakan teknik polymerase chain reaction
(PCR) untuk primer gen yang berhubungan dengan kolonisasi bakteri seperti cagA, ureA, ureC dan
16S RNA. Empat (5,47%) dari 73 sampel menunjukkan hasil positif untuk seluruh gen kecuali ureA
dimana dua sampel diantaranya menunjukkan pita DNA non spesifik yang juga positif untuk uji
urease. Diduga hasil ini dipengaruhi oleh ukuran produk PCR. Tidak ada hasil positif untuk sampel
dari slide. Teknik uji PCR dapat diandalkan namun masih memerlukan dukungan uji yang lain
seperti urea breath test atau serologi. Kekebalan bakteri ini terhadap obat dapat diuji dengan
penelusuran DNA berlabel radioisotop 32P menggunakan gel poliakrilamid 7,5%. Perubahan
mobilitas pita DNA hasil amplifikasi dengan primer khas menunjukkan bahwa bakteri diduga
kebal. Pelabelan ini relatif lebih sensitif dibandingkan dengan pelabelan konvensional, namun
memerlukan prosedur yang lebih intensif.