IMPLEMENTASI TEKNIK NUKLIR UNTUK ANALISIS RESISTENSI MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS TERHADAP RIFAMPISIN

lnfeksi Mycobacterium tuberculosis merupakan penyebab tingginya kematian
akibat tUberkulosis (TB) terutama negara-negara di Asia dimana Indonesia menempati peringkat ketiga dari
22 negara dengan kasus TB tinggi. Permasalahan menjadi lebih serius oleh merebaknya bakteri yang
resisten terhadap obat anti-TB. Teknik molekuler dengan menggunakan DNA berlabel radioisotop dapat
diandalkan untuk mengetahui mekanisme molekuler penyebab resistensi terhadap rifampisin. Dalam
penelitian ini, karakteristik molekuler bagian gen rpoB telah dianalisis dengan teknik nested polymerase
chain reaction (PCR) untuk melabel deoxyribonucleic acid (DNA) dengan {alfa P32-dCTP] pada 70 sputum
basil tahan asam (BTA) positif Perubahan mobilitas pita produk hol-PCR 157-base pairs (bp) dianalisis
dengan teknik single strand conformational polymorphism (SSCP) pada gel poliakrilamid. Hasil deteksi
menunjukkan bahwa 60 (85,71%) dari 70 sampel sputum adalah posilif PCR. Analisis mulnsi dengan SSCP
berhasil mengungkapkan bahwa 5 (7,1%) isolat diduga mengandung mutasi pada daerah 81 bp gen rpoB
pada kodon 526 yakni mutasi titik (CAC-TAC) yang menyebabkan perubahan asam amino histidin (His)
menjadi tirosin (Tyr). Untuk kelompok sampel lain sebanyak 104, hanya II (10,6%) diantaranya positif
yang mungkin disebabkan karena perbedaan kondisi reaksi PCR. Hasil studi ini mengindikasikan bahwa
mekanisme molekuler resistensi rifampin isolat M. tuberculosis melibatkan perubahan gen rpoB dan
diagnosa molekuler dengan DNA berlabel radioisotop P-32 sangat berguna untuk melldeteksi resistensi
dengan lebih sensitif.