DETEKSI MUTASI GEN PNCA SEBAGAI PENYEBAB RESISTENSI M. TUBERCULOSIS TERHADAP PIRAZINAMID DENGAN TEKNIK PCR-SSCP DAN AUTORADIOGRAFI

Resistensi M tuberculosis terhadap obat semakin memperberat upaya pengendalian penyakit tuberkulosis (TB) di
Indonesia. Tujuan penelitian ini adalah menguji resistensi M tuberculosis terhadap pirazinamid (PZA)
dengan menganalisis mutasi tiga segmen gen pncA, yang mengkode enzim PZase sebagai target PZA,
menggunakan teknik polymerase chain reaction (PCR) dan single strand conformation polymorphism (SSCP)
radioaktif. Perubahan mobilitas deoxyribonucleic acid (DNA) dari gen pncA yang dilabel dengan alfa 32PdCTP
pada gel akrilamid ditelusuri dengan autoradiografi. Dengan menggunakan primer P1-P2 gen pncA,
dari 117 sampel yang diuji, 60 diantaranya menunjukkan PCR positif dan 2 (3,33%) diantaranya diduga
resisten PZA karena memiliki mutasi gen. Dengan primer yang lain (pncA1) diketahui bahwa dari 80 sampel
yang dianalisis, 36 diantaranya PCR positif dan tidak ada sampel yang mengandung mutasi, sedangkan
dengan primer pncA2 telah dilakukan SSCP terhadap 20 sampel dan tidak ada yang menunjukkan resistensi.
Kesimpulan yang dapat diambil adalah bahwa mutasi gen pncA dapat digunakan sebagai petunjuk resistensi
M. tuberculosis terhadap PZA. Teknik deteksi molekuler ini sangat membantu pengobatan yang lebih efektif
dan cepat serta dapat mendukung hasil diagnosa sehingga memperkecil risiko kematian penderita dan
penularannya.